IPSC培養(yǎng)基的常見類型有哪些？
更新時(shí)間：2025-07-20
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IPSC培養(yǎng)基（誘導(dǎo)多能干細(xì)胞培養(yǎng)基）是用于誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPSCs）生長和擴(kuò)增的特殊培養(yǎng)基。iPSCs是通過重編程技術(shù)將成體細(xì)胞（如皮膚細(xì)胞或血液細(xì)胞）轉(zhuǎn)化為多能狀態(tài)，這種狀態(tài)下的細(xì)胞具有分化為多種細(xì)胞類型的能力。
IPSC培養(yǎng)基的構(gòu)成：
1.基本培養(yǎng)基
基本培養(yǎng)基通常是標(biāo)準(zhǔn)的細(xì)胞培養(yǎng)基，如Dulbecco'sModifiedEagleMedium（DMEM）或KnockOutDMEM/F-12。這些培養(yǎng)基含有細(xì)胞生長所需的基本成分，包括氨基酸、維生素、無機(jī)鹽等。
2.血清
盡管一些無血清培養(yǎng)基已經(jīng)被開發(fā)出來，但傳統(tǒng)的培養(yǎng)基通常使用胎牛血清（FBS）作為添加劑，提供細(xì)胞生長所需的生長因子、激素等。血清的質(zhì)量和來源對培養(yǎng)基的性能至關(guān)重要。
3.生長因子
iPSCs的生長需要特定的生長因子，這些因子能夠促進(jìn)細(xì)胞的自我更新并防止分化。常用的生長因子包括：
-bFGF（基礎(chǔ)成纖維生長因子）：促進(jìn)iPSCs的自我更新，避免其分化。
-LIF（白血病抑制因子）：在某些情況下，LIF與bFGF一起使用，特別是在小鼠iPSCs培養(yǎng)中，用于維持其多能性。
-GSK-3β抑制劑：GSK-3β抑制劑如CHIR99021可以促進(jìn)自我更新。
-TGF-β信號通路抑制劑：這種抑制劑通常用于抑制干細(xì)胞的分化。
4.小分子化合物
近年來，科學(xué)家發(fā)現(xiàn)一些小分子化合物能夠通過靶向信號通路調(diào)控iPSCs的生長。例如，抑制Wnt信號通路的化合物可以幫助維持iPSCs的多能性，而通過激活某些通路可以增強(qiáng)細(xì)胞的增殖能力。
5.抗生素和抗真菌劑
為了防止細(xì)菌、真菌污染，培養(yǎng)基中通常會添加抗生素（如青霉素、鏈霉素）和抗真菌劑（如兩性霉素B）。
IPSC培養(yǎng)基的常見類型有：
1.初代
這種培養(yǎng)基通常用于最初誘導(dǎo)iPSCs的建立，包括使用特定的重編程因子（如Oct4、Sox2、Klf4和c-Myc）對成體細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染。初代培養(yǎng)基的組成通常比較基礎(chǔ)，除了基本的營養(yǎng)成分，還會加入一些增殖因子以促進(jìn)細(xì)胞生長。
2.維護(hù)型培養(yǎng)基
當(dāng)iPSCs已經(jīng)成功誘導(dǎo)出來并進(jìn)入擴(kuò)增階段時(shí)，維護(hù)型培養(yǎng)基就顯得尤為重要。它能夠維持細(xì)胞的多能性，避免分化。典型的維護(hù)型培養(yǎng)基含有bFGF、LIF以及其他必要的生長因子，能夠在長時(shí)間內(nèi)保證iPSCs的穩(wěn)定生長。
3.無血清培養(yǎng)基
隨著對iPSC技術(shù)的研究不斷發(fā)展，出現(xiàn)了一些無血清的培養(yǎng)基。這些培養(yǎng)基去除了血清帶來的不確定性，使用替代成分（如重組生長因子或化學(xué)合成小分子）以維持細(xì)胞的增殖和多能性。這些培養(yǎng)基在臨床應(yīng)用中尤其具有優(yōu)勢，因?yàn)樗鼈儽苊饬搜宓呐尾町惡蜐撛诘拿庖叻磻?yīng)。
